Objetivo e etapas do teste de cariótipo

Um teste de cariótipo é um tipo de teste genético que usa sangue ou fluidos corporais para analisar seus cromossomos. É comumente usado para rastrear e confirmar anomalias cromossômicas.

Este artigo aborda o que é um teste de cariótipo, quando é usado e as etapas envolvidas na realização do teste. Também explica o que o teste é usado para detectar e o que significa se os resultados forem anormais.

O que é um teste de cariótipo?

Um cariótipo é uma fotografia dos cromossomos de uma célula. Os cariótipos podem ser obtidos de:

• Células sanguíneas
• Células da pele fetal
• Bucalcélulas (bochecha)
• Células da medula óssea

Um teste de cariótipo analisa o tamanho, a forma e o número de cromossomos em uma amostra de células.

Condições diagnosticadas com um teste de cariótipo

Os cariótipos podem ser usados ​​para rastrear e confirmar anomalias cromossômicas, como síndrome de Down e síndrome do olho de gato, e existem vários tipos diferentes de anomalias que podem ser detectadas.

Exemplos de trissomias incluem:

• Síndrome de Down (trissomia 21)
• Síndrome de Edward (trissomia 18)
• Síndrome de Patau (trissomia 13)
• síndrome de Klinefelter (XXY e outras variações); A síndrome de Klinefelter ocorre em 1 em cada 500 recém-nascidos do sexo masculino
• Síndrome do Triplo X (XXX)

Um exemplo demonossomiainclui:

• Síndrome de Turner (X0) ou monossomia X: Aproximadamente 10% dos abortos espontâneos no primeiro trimestre são devidos à síndrome de Turner, mas esta monossomia está presente em apenas cerca de 1 em 2.500 nascidos vivos do sexo feminino

Exemplos dedeleções cromossômicasincluem:

• Síndrome de Cri-du-Chat (ausência do cromossomo 5)
• Síndrome de Williams (ausência do cromossomo 7)

Translocações: Existem muitos exemplos de translocações, incluindo a síndrome de Down de translocação. As translocações Robertsonianas são bastante comuns, ocorrendo em aproximadamente 1 em cada 1.000 pessoas.

Mosaicismoé uma condição na qual algumas células do corpo apresentam uma anomalia cromossômica e outras não. Por exemplo, síndrome de Down em mosaico ou trissomia 9 em mosaico. A trissomia 9 completa não é compatível com a vida, mas a trissomia 9 em mosaico pode resultar em um nascimento vivo.

Quando estiver pronto

Existem muitas situações em que um cariótipo pode ser recomendado pelo seu médico. Isso pode incluir:

• Bebês ou crianças com suspeita de condição cromossômica: Aqueles que têm condições médicas que sugerem uma anomalia cromossômica que ainda não foi diagnosticada podem ser submetidos a testes de cariótipo.
• Adultos com suspeita de condição cromossômica:Por exemplo, homens com doença de Klinefelter podem não ser diagnosticados até a puberdade ou a idade adulta. Alguns dos distúrbios da trissomia em mosaico também podem não ser diagnosticados.
• Infertilidade: Um cariótipo genético pode ser feito para infertilidade. Conforme observado acima, algumas anomalias cromossômicas podem não ser diagnosticadas até a idade adulta. Uma mulher com síndrome de Turner ou um homem com uma das variantes da doença de Klinefelter pode não estar ciente da doença até lidar com a infertilidade.
• Teste pré-natal: Em alguns casos, como na síndrome de Down de translocação, a condição pode ser hereditária e os pais podem ser testados se uma criança tiver nascido com síndrome de Down. (É importante notar que na maioria das vezes a síndrome de Down não é um distúrbio hereditário, mas sim uma mutação casual.)
• Natimorto: Um cariótipo geralmente é feito como parte do teste após um natimorto.
• Abortos recorrentes: Um cariótipo parental de abortos recorrentes pode fornecer pistas sobre as razões dessas perdas recorrentes devastadoras. Pensa-se que as anomalias cromossómicas, como a trissomia 16, são a causa de pelo menos 50% dos abortos espontâneos.
• Leucemia: O teste de cariótipo também pode ser feito para ajudar a diagnosticar leucemias, por exemplo, procurando o cromossomo Filadélfia encontrado em algumas pessoas com doença crônica.mielógenoleucemia ou leucemia linfocítica aguda.

Como um teste de cariótipo é realizado

Um teste de cariótipo pode parecer um simples exame de sangue, o que faz muitas pessoas se perguntarem por que demora tanto para obter os resultados. Este teste é bastante complexo após a coleta.

Preparando-se para sua consulta

Veja a seguir as etapas para que você entenda o que acontece durante o tempo de espera pelo teste.

Coleta de amostras

O primeiro passo para realizar um cariótipo é coletar uma amostra.

Os seguintes métodos podem ser usados ​​para coletar uma amostra de um feto:

• Amniocentese: Este método coleta células da pele fetal do líquido amniótico.
• Teste de amostragem de vilosidades coriônicas (CVS): Com este procedimento, as células utilizadas para o teste são retiradas de um pedaço de placenta.

Os seguintes métodos podem ser usados ​​para coletar uma amostra de bebês, crianças e adultos:

• Exame de sangue: Uma amostra de sangue pode ser obtida de uma veia do braço usando uma pequena agulha.
• Cotonete de bochecha:Este tipo de amostra é obtido esfregando a parte interna da bochecha.
• Teste de medula óssea:Uma amostra de medula óssea é frequentemente retirado da parte de trás do osso do quadril.

Transporte para o Laboratório

Os cariótipos são realizados em um laboratório específico chamado laboratório de citogenética – um laboratório que estuda cromossomos. Nem todos os hospitais possuem laboratórios de citogenética. Se o seu hospital ou centro médico não tiver laboratório de citogenética próprio, a amostra do teste será enviada para um laboratório especializado em análise de cariótipo. A amostra de teste é analisada por tecnólogos citogenéticos especialmente treinados, Ph.D. citogeneticistas ou geneticistas médicos.

Separando as células

Para analisar os cromossomos, a amostra deve conter células que estejam se dividindo ativamente. No sangue, os glóbulos brancos dividem-se ativamente. A maioria das células fetais também se divide ativamente. Assim que a amostra chega ao laboratório de citogenética, as células que não se dividem são separadas das células em divisão usando produtos químicos especiais.

Células em crescimento

Para ter células suficientes para analisar, as células em divisão são cultivadas em meios especiais ou em cultura celular. Este meio contém produtos químicos e hormônios que permitem que as células se dividam e se multipliquem. Este processo de cultura pode levar de três a quatro dias para células sanguíneas e até uma semana para células fetais.

Sincronizando Células

Os cromossomos são uma longa sequência de DNA humano. Para ver os cromossomos ao microscópio, os cromossomos devem estar em sua forma mais compacta em uma fase de divisão celular (mitose) conhecida como metáfase. Para levar todas as células a este estágio específico de divisão celular, as células são tratadas com uma substância química que interrompe a divisão celular no ponto onde os cromossomos são mais compactos.

Liberando os cromossomos de suas células

Para ver esses cromossomos compactos ao microscópio, os cromossomos precisam estar fora das células. Isto é feito tratando as células com uma solução especial que faz com que elas se rompam. Isso é feito enquanto as células estão em uma lâmina microscópica. Os restos de detritos das células são removidos, deixando os cromossomos presos na lâmina.

Colorindo os cromossomos

Os cromossomos são naturalmente incolores. Para diferenciar um cromossomo do outro, um corante especial chamado corante Giemsa é aplicado na lâmina. O corante Giemsa cora regiões dos cromossomos ricas nas bases adenina (A) e timina (T). Quando corados, os cromossomos parecem fios com faixas claras e escuras. Cada cromossomo possui um padrão específico de faixas claras e escuras que permitem ao citogeneticista distinguir um cromossomo do outro. Cada faixa escura ou clara abrange centenas de genes diferentes.

Análise

Depois que os cromossomos são corados, a lâmina é colocada no microscópio para análise. Uma foto é então tirada dos cromossomos. Ao final da análise, o número total de cromossomos será determinado e os cromossomos organizados por tamanho.

Contando cromossomos

A primeira etapa da análise é a contagem dos cromossomos. A maioria dos humanos tem 46 cromossomos. Pessoas com síndrome de Down têm 47 cromossomos. Também é possível que as pessoas tenham cromossomos ausentes, mais de um cromossomo extra ou uma parte de um cromossomo ausente ou duplicado. Observando apenas o número de cromossomos, é possível diagnosticar diferentes condições, incluindo a síndrome de Down.

Classificando cromossomos

Depois de determinar o número de cromossomos, o citogeneticista começará a classificar os cromossomos. Para classificar os cromossomos, eles compararão o comprimento dos cromossomos, a localização dos centrômeros (as áreas onde as duas cromátides estão unidas) e a localização e os tamanhos das bandas G. Os pares de cromossomos são numerados do maior (número 1) ao menor (número 22). Existem 22 pares de cromossomos, chamados autossomos, que correspondem exatamente. Existem também os cromossomos sexuais; as mulheres têm dois cromossomos X, enquanto os homens têm um X e um Y.

Olhando para a estrutura

Além de observar o número total de cromossomos e os cromossomos sexuais, o citogeneticista também examinará a estrutura dos cromossomos específicos para garantir que não haja material ausente ou adicional, bem como anormalidades estruturais, como translocações. Uma translocação ocorre quando uma parte de um cromossomo é ligada a outro cromossomo. Em alguns casos, dois pedaços de cromossomos são trocados (uma translocação balanceada) e outras vezes um pedaço extra é adicionado ou faltante apenas em um cromossomo.

O resultado final

No final, o cariótipo final mostra o número total de cromossomos, o sexo e quaisquer anormalidades estruturais nos cromossomos individuais. Uma imagem digital dos cromossomos é gerada com todos os cromossomos organizados por número.

O que significam os resultados do cariótipo

Resultados normaisparece o seguinte:

• Mulheres: 44 autossomos e 2 cromossomos sexuais (XX), escritos como 46, XX
• Homens: 44 autossomos e 2 cromossomos sexuais (XY), escritos como 46, XY

Resultados anormaispode envolver:

• Ter muitos ou poucos cromossomos
• Mudanças na estrutura dos cromossomos

Tais anormalidades podem estar ligadas a certas síndromes ou condições genéticas.

Limites do teste de cariótipo

Observe que, embora o teste de cariótipo possa fornecer muitas informações sobre os cromossomos, esse teste não pode dizer se estão presentes mutações genéticas específicas, como aquelas que causam a fibrose cística. Seu conselheiro genético pode ajudá-lo a entender o que os testes de cariótipo podem e o que eles não podem dizer. Mais estudos são necessários para avaliar o possível papel das mutações genéticas em doenças ou abortos espontâneos.

Também é importante observar que, às vezes, o teste de cariótipo pode não ser capaz de detectar algumas anomalias cromossômicas, como quando há mosaicismo placentário.

Atualmente, o teste de cariótipo no pré-natal é bastante invasivo, exigindo amniocentese ou amostragem de vilosidades coriônicas. No entanto, avaliar o ADN livre de células numa amostra de sangue de uma pessoa grávida é agora comum como uma alternativa muito menos invasiva para o diagnóstico pré-natal de anomalias genéticas num feto.