O que é citometria de fluxo?

A citometria de fluxo é uma técnica de laboratório usada para observar células individuais em uma amostra de sangue, sêmen ou medula óssea. Os resultados da citometria de fluxo podem ser usados ​​para diagnóstico e tratamento do câncer, para monitorar a saúde de pessoas com HIV e para outros fins.

A citometria de fluxo é útil quando um profissional de saúde precisa observar um grande número de células, uma célula de cada vez. Essas células são enviadas através de um tubo muito estreito, permitindo que as propriedades de células individuais sejam medidas usando lasers ou outros tipos de luz.

Este artigo discute como funciona um teste de citometria de fluxo e quando ele é usado. Também o ajudará a saber mais sobre como é feita uma análise de citometria de fluxo, o que esperar e o que os resultados normalmente significam.

Para que serve a citometria de fluxo

A citometria de fluxo é usada em muitas áreas de testes clínicos. Isso ocorre porque a análise por citometria de fluxo fornece uma maneira relativamente simples de observar tipos específicos de células, incluindo:

• Células cancerosas
• Células imunológicas
• Espermatozoides

Contanto que haja uma maneira de marcar células para detecção, este método pode ser usado para localizá-las. Normalmente, tudo o que é necessário para identificar um tipo específico de célula é criar um anticorpo monoclonal para reconhecer essa célula. Em seguida, um corante fluorescente é ligado ao anticorpo. A citometria de fluxo pode encontrar todas as células visadas pelo anticorpo.

Existem vários usos comuns para citometria de fluxo:

Função imunológica com infecção por HIV

A análise de citometria de fluxo é usada para contar o número de células T CD4 no sangue de alguém com HIV. Isso ajuda a determinar o quão saudável é o seu sistema imunológico e a rastrear qualquer dano causado pelo vírus. Isso geralmente é feito em uma amostra de sangue.

Medula Óssea e Anemia

O teste de citometria de fluxo é usado para contar o número de reticulócitos (glóbulos vermelhos imaturos) na medula óssea. Isso pode ajudar a determinar a causa da anemia. Também pode ser usado para verificar a saúde da medula óssea após um transplante ou quimioterapia. Isso geralmente é feito em uma amostra de medula óssea.

Transplantes de órgãos

O teste de histocompatibilidade (HLA) é feito antes de um transplante de órgão, seja alguém doador ou receptor. Isso geralmente é feito em uma amostra de sangue usando análise de citometria de fluxo.

Contagens de esperma

A citometria de fluxo é usada para verificar o número de espermatozoides em uma amostra de sêmen. Isso pode ser feito como parte de uma avaliação de infertilidade ou para verificar se a vasectomia foi bem-sucedida.

Cânceres Relacionados ao Sangue

Os resultados da citometria de fluxo podem ser usados ​​para diagnosticar e classificar leucemia ou linfoma. Isso pode exigir uma amostra de sangue, medula óssea ou um tipo diferente de amostra de tecido.

Distúrbios de coagulação sanguínea

A análise de citometria de fluxo é feita para avaliar se as plaquetas, células sanguíneas que são uma parte fundamental do sistema de coagulação, estão funcionando corretamente.

O teste específico de citometria de fluxo e o tipo de amostra dependerão das informações de que o profissional de saúde precisa. O mesmo se aplica a quaisquer outros exames solicitados, como a histoquímica, no diagnóstico de certos tipos de câncer.

Como funciona a citometria de fluxo

A citometria de fluxo baseia-se no isolamento de células individuais em uma amostra que contém muitas células. O teste permite que os profissionais de saúde observem células específicas, uma de cada vez. Isto é conseguido através do processamento de células através de um protocolo comum de citometria de fluxo.

Os resultados da citometria de fluxo são então usados ​​para diagnosticar ou monitorar uma condição de saúde específica. Embora esses testes sejam úteis em diversas situações, eles têm limitações.

Por exemplo, a presença de inflamação pode alterar o número de tipos específicos de células sanguíneas numa amostra. Isso pode levar a um resultado de teste falso negativo ou falso positivo para certos tipos de câncer.

Com a análise do sêmen, a atividade sexual recente pode tornar o teste impreciso. Os resultados dos testes de função plaquetária podem ser afetados ao tomar um medicamento antiinflamatório não esteróide (AINE).

Quão precisa é a citometria de fluxo?

A precisão da citometria de fluxo depende de uma série de fatores, incluindo o tipo de teste realizado, a qualidade das amostras, o nível de habilidade do patologista e o equipamento utilizado tanto para coletar as amostras quanto para analisá-las.

Alguns destes equipamentos podem incluir:

• Agulhas intravenosas ou outras, bem como tubos de coleta de amostras
• Imagens para orientar a biópsia ou outro procedimento de amostragem por citometria de fluxo
• Máquinas especiais projetadas para processamento a laser da amostra
• Computadores avançados para orientar procedimentos e processar resultados
• Sistemas automatizados cada vez mais utilizados em dados de citometria de fluxo

Riscos e Contra-indicações

Os riscos associados à citometria de fluxo estão limitados aos riscos associados à colheita de amostras e dependerão do tipo de amostra necessária.

Uma amostra de sangue ou sêmen apresenta risco comparativamente baixo quando coletada. Em contraste, uma amostra de medula óssea ou de tecido é mais difícil e acarreta alguns riscos adicionais.

Esses testes ainda são considerados bastante seguros. Os riscos de aspiração de medula óssea e/ou biópsia de tecido são incomuns, mas podem incluir:

• Hematomas no local
• Sangramento do local
• Infecção
• Reações à anestesia

Seu médico pode começar com citometria de fluxo em uma amostra de sangue antes de passar para testes mais invasivos. Não há contra-indicações específicas para a citometria de fluxo, embora um protocolo de citometria de fluxo possa precisar ser adaptado para algumas pessoas.

O que esperar

Se você for fazer um teste envolvendo citometria de fluxo, existem algumas etapas gerais que você pode esperar. Converse com seu médico, entretanto, sobre sua situação específica.

Antes do teste

A preparação para um teste de citometria de fluxo depende de sua finalidade e de seu histórico médico individual. Em alguns casos, uma amostra pode ser coletada no momento em que seu médico determinar a necessidade dela. Em outros, pode ser necessário retornar após interromper certas atividades ou medicamentos que toma.

Você também deve informar ao seu médico se estiver grávida ou pensar que pode estar grávida e se for sensível ou alérgico a algum medicamento ou item médico, como o látex.

Se o seu médico deseja que você faça um teste de citometria de fluxo, é importante perguntar como os medicamentos ou suplementos que você toma podem afetar os resultados do teste.

Uma amostra de sangue coletada para citometria de fluxo é feita da mesma forma que outras coletas de sangue e deve levar apenas alguns minutos. Espera-se que uma amostra de sêmen demore mais, e as amostras de medula óssea serão mais complicadas de coletar, dependendo da sedação necessária. Em todos os casos, dependerá do tipo de amostra.

O tempo necessário para obter uma amostra para testes de citometria de fluxo dependerá do tipo de tecido. Obter uma amostra do fígado é muito diferente de obter uma amostra de um gânglio linfático.

Algumas amostras podem ser coletadas no consultório do seu médico, mas outras precisarão ser feitas em um centro cirúrgico ambulatorial. Se você estiver passando por um teste de medula óssea ou outra biópsia, pode ser necessário remover roupas e joias antes do teste. Será fornecida uma bata hospitalar.

Você deve poder comer e beber normalmente antes de um teste de citometria de fluxo, mas isso pode mudar se certos tipos de sedação forem necessários. Verifique com seu médico as recomendações.

A citometria de fluxo é cara?
A citometria de fluxo pode ser cara e algumas seguradoras exigem autorização prévia antes da realização desses testes. Verifique com sua seguradora e provedor sobre quaisquer requisitos. Lembre-se de trazer também seu cartão de seguro saúde e documento de identificação com foto para a consulta.

Durante o teste

Você pode consultar vários profissionais de saúde, dependendo do tipo de amostra necessária para o seu teste de citometria de fluxo. Os membros da equipe de saúde desempenharão diferentes funções durante a sua consulta.

Por exemplo, um técnico coleta uma amostra de sangue durante um procedimento bastante simples. Para uma aspiração e biópsia da medula óssea, você pode consultar uma equipe de saúde que inclui outros especialistas.

Os testes de medula óssea e muitos procedimentos de biópsia exigirão uma pequena incisão no local e a inserção de uma agulha enquanto você permanece imóvel. Imagens podem ser usadas para orientar o processo.

Um profissional de saúde pressionará o local para controlar qualquer sangramento após a coleta da amostra e cobrirá o local com um curativo. Em seguida, você será solicitado a ficar imóvel por 10 a 15 minutos. Se sentir qualquer dor ou desconforto após o teste, poderá ser solicitado que você tome um analgésico.

Em alguns casos, seu médico pode fazer acompanhamento para avaliar sua recuperação após as amostras necessárias para um teste de citometria de fluxo.

Depois do teste

Na maioria dos casos, você não precisa alterar sua rotina após uma coleta de sangue necessária para análise de citometria de fluxo. Para amostras de medula óssea e biópsia, pode ser necessário limitar a atividade ou evitar tomar banho por 24 horas ou mais. Seu médico oferecerá instruções específicas a serem seguidas após o teste.

É importante entrar em contato com seu médico se você tiver algum dos seguintes sintomas após um teste de medula óssea ou outra biópsia:

• Febre
• Sangramento que não para ou que penetra no curativo
• Dor que piora com o tempo
• Inchaço no local da biópsia
• Vermelhidão ou drenagem no local da biópsia que piora com o tempo.

Se você sentir dor leve a moderada após um desses procedimentos, geralmente ela deve ser controlada com analgésicos de venda livre. No entanto, se você tiver algum problema de sangramento, poderá ser instruído a não usar aspirina e alguns outros produtos. Verifique com seu médico quais medicamentos para dor seriam melhores.

Interpretando Resultados

Uma análise de citometria de fluxo pode levar várias semanas para retornar. Isso dependerá dos tipos específicos de células sob investigação, bem como do laboratório utilizado. A citometria de fluxo é um teste muito técnico e muitos laboratórios podem ter capacidade limitada para processar amostras.

Existem vários tipos comuns de resultados de testes de citometria de fluxo.

Imunofenotipagem

Este teste de citometria de fluxo é usado para diagnosticar leucemia ou linfoma. Este teste geralmente é feito após resultados atípicos serem observados em um hemograma completo ou diferencial de glóbulos brancos (leucócitos). Esses resultados explicarão se há células anormais presentes e que tipos de células são, como parte do seu diagnóstico.

Contagem de reticulócitos

Este teste avalia a função da medula óssea e a produção de glóbulos vermelhos. Geralmente é interpretado em combinação com outros resultados de exames, como contagem de glóbulos vermelhos e/ou hematócrito. Os resultados deste teste não devem ser interpretados por si só. Valores baixos e altos podem ser bons ou problemáticos, dependendo das circunstâncias.

Contagens de CD4

A análise de citometria de fluxo fornece o número de células CD4 em um milímetro cúbico de sangue. Uma contagem normal de CD4 está entre 500 e 1.500. Se a sua contagem de CD4 for inferior a 500, significa que o seu sistema imunológico pode estar suprimido. As causas podem incluir HIV ou medicamentos usados ​​para suprimir o sistema imunológico. Para as pessoas com VIH, a contagem de CD4 pode variar com o tempo, mesmo sem que a sua saúde se altere.

Seu médico provavelmente lhe informará sobre os padrões nos resultados dos testes, em vez de observar resultados específicos. Para pessoas que tomam medicamentos imunossupressores após um transplante de órgão, uma contagem baixa de CD4 significa que esses medicamentos estão funcionando.

Resultados do teste HLA

Os resultados desses testes dirão se um doador e um receptor de órgãos são compatíveis ou não e, se não, quantas incompatibilidades eles apresentam. Números baixos significam que um transplante tem maior probabilidade de ser bem-sucedido e um emparelhamento sem incompatibilidades é o melhor.

Análise de sêmen

Os resultados do teste de citometria de fluxo são usados ​​para relatar quantos espermatozoides estão em uma amostra e também quão bem eles estão funcionando.

Se a citometria de fluxo for utilizada para diagnóstico, ela será realizada apenas uma vez. No entanto, se a citometria de fluxo estiver sendo usada para monitorar uma condição de saúde, pode ser necessário repetir o teste regularmente.

Por exemplo, pode ser recomendado que as pessoas com VIH sejam submetidas a testes CD4 com uma frequência de seis em seis meses, ou até mais frequentemente, dependendo da forma como respondem à medicação.