Teste de amplificação de ácido nucleico para DSTs

Os testes de amplificação de ácidos nucleicos, também conhecidos como NAATs, podem detectar uma variedade de diferentes infecções sexualmente transmissíveis (DSTs, anteriormente chamadas de doenças sexualmente transmissíveis, DSTs). Muitos testes de urina para DSTs são realizados usando NAATs.

Os testes NAAT funcionam porque identificam pequenas quantidades de DNA ou RNA nas amostras de teste. Eles podem, portanto, ser usados ​​para identificar bactérias, vírus e outrospatógenosmesmo quando o material de interesse está presente em quantidades muito pequenas.

Este artigo explica o uso de testes de amplificação de ácidos nucleicos para diagnosticar DSTs e como eles funcionam com várias amostras de teste.

Como funcionam os testes de amplificação de ácidos nucleicos?

Embora existam vários tipos de NAATs, todos se baseiam nos mesmos princípios. Por exemplo, os NAAT usados ​​para detectar o vírus COVID-19 podem contar com métodos que incluem:

• Transcrição reversapolimerasereação em cadeia (RT-PCR)
• Amplificação mediada por transcrição (TMA)
• Repetições palindrômicas curtas agrupadas regularmente interespaçadas (CRISPR)
• Amplificação de deslocamento de fio (SDA)

O NAAT utiliza uma série de reações químicas repetidas para fazer numerosas cópias e amplificar a quantidade de DNA ou RNA que os profissionais de saúde estão tentando detectar.

Isto oferece algumas vantagens. Com os testes PCR usados ​​para detectar DSTs, por exemplo, o teste não precisa de uma amostra viva (como é o caso de uma cultura viral ou bacteriana) e pode ser feito rapidamente.Muitas vezes detecta uma infecção mais recente.

Quão preciso é um teste NAAT para DSTs?
Os testes NAAT podem fornecer resultados altamente precisos. Uma revisão de estudos de 2021 analisou testes no local de atendimento (realizados durante sua consulta médica) para diagnosticar clamídia. Os estudos compararam os testes NAAT e de detecção de antígenos, juntamente com os tipos de amostras (urina, esfregaço, etc.). Os testes NAAT foram significativamente mais sensíveis que os testes de detecção de antígenos, com excelente precisão em amostras de urina.

NAATs em testes de DST

O processo de amplificação de ácidos nucleicos bacterianos ou virais não é em si um teste de IST. Em vez disso, uma vez que a quantidade de DNA ou RNA tenha sido aumentada na amostra usando PCR ouligasereação em cadeia (LCR), outra etapa é usada para detectar e diagnosticar uma infecção.

Esses testes geralmente envolvem alguma forma de hibridização de ácidos nucleicos. Nesses testes, a amostra é sondada com uma fita complementar de DNA ou RNA produzida artificialmente e marcada de alguma forma que facilita a detecção. Pode ser útil imaginá-lo como uma etiqueta que brilha no escuro que se fixa apenas a uma informação de identificação muito específica.

Este processo permite que os prestadores de cuidados de saúde detectem um agente patogénico de IST mesmo quando apenas um número muito pequeno de organismos está presente. Eles também possibilitam alguns testes em casa.

NAATs e amostras de urina
Os NAATs são extremamente úteis para alguns testes de DST, especialmente porque funcionam com amostras de urina fáceis de coletar. Lembre-se de que nem todas as ISTs podem ser bem detectadas com exames de urina, entre eles a tricomoníase e o papilomavírus humano (HPV). Mesmo para a clamídia, o CDC ainda considera um esfregaço vaginal para fornecer as melhores amostras para diagnóstico em mulheres.

Exemplo deste teste em ação

O desempenho de um teste NAAT para diagnosticar DSTs pode ser visto no exemplo do herpes genital (geralmente vírus herpes simplex tipo 2 ou HSV-2). Os NAATs são sensíveis na detecção de bactérias ou vírus sem procurar anticorpos anti-herpes, embora o ELISA e outros exames de sangue para HSV possam adicionar essa informação.

A amplificação de ácidos nucleicos também permitiu métodos de rastreio de clamídia e gonorreia mais fáceis e mais difundidos.A coleta de urina não requer conhecimentos médicos e é mais provável que as pessoas façam xixi em um copo do que façam um esfregaço genital. Portanto, tornou-se mais fácil para os prestadores de cuidados de saúde testarem um maior número de jovens para estas IST.

Os pesquisadores também usaram NAATs para obter mais informações sobre a extensão do problema das DSTs assintomáticas (sem sintomas) nos Estados Unidos. Programas de rastreio em larga escala baseados em NAAT foram implementados no serviço militar, por exemplo.

Estes testes em áreas urbanas, ou entre homens que fazem sexo com homens (HSH), permitem a detecção de IST em pequenas amostras de urina ou sangue que são frequentemente recolhidas como parte de grandes estudos de investigação sobre a saúde da população. 

NAATs e testes para infecção oral e anal
Em 2019, a Food and Drug Administration aprovou o teste NAAT para DSTs com amostras colhidas do reto ou faringe (garganta). Estas infecções são mais comuns em HSH e outros grupos com práticas sexuais anais e orais. Os pesquisadores consideraram a precisão do teste NAAT adequada (uma sensibilidade combinada de 93%) para amostras retais, mas pouco se sabe sobre amostras de garganta e mais estudos são necessários.